Анализ пцр инвитро

Анализ пцр инвитро

Независимая лаборатория ИНВИТРО, крупнейшая частная компания в сфере коммерческой лабораторной диагностики России, сообщает о расширении спектра лабораторных исследований, выполняемых методом полимеразменной цепной реакции (ПЦР).

С 1 декабря 2014 года пациентам ИНВИТРО стали доступны новые десять видов лабораторных исследований, направленных на комплексную оценку состояния микробиоценоза мочеполовой системы. Исследование биоматериала выполняется методом ПЦР.

Новый комплекс лабораторных исследований позволит выполнить исследование микрофлоры урогенитального тракта, выявить возбудителей инфекций, передаваемых половым путём, в том числе хламидиоза и трихомониаза, а также инфекций, вызванных грибком кандида. Кроме того, в новом перечне представлены лабораторные тесты для диагностики причин заболеваний мочеполовой системы, сопряженных с условно-патогенными микроорганизмами – микоплазмами и уреаплазмами.

Метод полимеразменной цепной реакции — один из самых современных методов исследования в лабораторной диагностике. Лабораторное обследование на инфекции методом ПЦР крайне важно, поскольку позволяет обнаружить даже единичные ДНК бактерий и вирусов. Сегодня это самый чувствительный метод диагностики ИППП, многие из которых могут протекать бессимптомно или иметь схожую клиническую картину.


Выявление конкретного возбудителя и определение его количества в микрофлоре организма человека дает возможность врачу поставить правильный диагноз и назначить эффективную терапию.

Обращаем внимание! Ввод спектра новых лабораторных тестов в городах присутствия ИНВИТРО на территории России будет осуществляться в несколько этапов. Уточняйте информацию в медицинских офисах вашего города о возможности заказа лабораторных исследований, представленных ниже.

Новые лабораторные исследования не только имеют клиническую значимость, но и наиболее привлекательны по стоимости.

Подробное описание новых программ комплексных лабораторных исследований и их стоимость, показания к назначению, интерпретация результатов представлены в разделе «Анализы и цены», закладка «Профили»:

  • №3020 ;
  • №3025;
  • №3022 ;
  • №3026 ;
  • №3021 ;
  • №3023 ;
  • №3024 ;
  • №3027 ;
  • №3028 ;
  • №3029 .

Источник: www.invitro.ru

В конце статьи см. словарь
Полимеразную цепную реакцию (ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году Кэри Мюллис (американский учёный). Впоследствии он получил за это изобретение Нобелевскую премию. В настоящее время ПЦР-диагностика является, одним из самых точных и чувствительных методов диагностики инфекционных заболеваний.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе).
В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). В результате нарабатываются количества ДНК, достаточные для визуальной детекции. При этом происходит копирование только того участка, который удовлетворяет заданным условиям, и только в том случае, если он присутствует в исследуемом образце.
Кроме простого увеличения числа копий ДНК (этот процесс называется амплификацией), ПЦР позволяет производить множество других манипуляций с генетическим материалом (введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК), и широко используется в биологической и медицинской практике, например, для диагностики заболеваний (наследственных, инфекционных), для установления отцовства, для клонирования генов, введения мутаций, выделения новых генов.


Специфичность и применение

ПЦР — метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически. Метод ПЦР позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько молекул ДНК возбудителя.
ПЦР позволяет диагностировать наличие долго растущих возбудителей, не прибегая к трудоёмким микробиологическим методам, что особенно актуально в гинекологии и урологии при диагностике урогенитальных инфекций, передающихся половым путем (ИППП).
Также, этим методом проводят диагностику вирусных инфекций, таких как гепатиты, ВИЧ и др. Чувствительность метода значительно превосходит таковую у иммунохомических и микробиологических методов, а принцип метода позволяет диагностировать наличие инфекций со значительной антигенной изменчивостью.
Специфичность ПЦР при использовании технологии PCR даже для всех вирусных, хламидийных, микоплазменных, уреаплазменных и большинства других бактериальных инфекций достигает 100%. Метод ПЦР позволяет выявлять даже единичные клетки бактерий или вирусов. ПЦР-диагностика обнаруживает наличие возбудителей инфекционных заболеваний в тех случаях, когда другими методами (иммунологическими, бактериологическими, микроскопическими) это сделать невозможно.



Особенно эффективен метод ПЦР для диагностики трудно культивируемых, некультивируемых и скрыто существующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях.
Применение ПЦР-диагностики также очень эффективно в отношении возбудителей с высокой антигенной изменчивостью и внутриклеточных паразитов. Методом ПЦР возможно выявление возбудителей не только в клиническом материале, полученном от больного, но и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва и т. д.). В урологической и гинекологической практике — для выявления хламидиоза, уреаплазмоза, гонореи, герпеса, гарднереллёза, микоплазменной инфекции, ВПЧ — вирусов папилломы человека; в пульмонологии — для дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных пневмоний, туберкулёза; в гастроэнтерологии — для выявления хеликобактериоза; в клинике инфекционных заболеваний — в качестве экспресс-метода диагностики сальмонеллёза, дифтерии, вирусных гепатитов В, С и G; в гематологии — для выявления цитомегаловирусной инфекции, онковирусов.
Специфичность ПЦР основана на образовании комплементарных комплексов между матрицей и праймерами — короткими синтетическими олигонуклеотидами длиной 18 — 30 букв. Каждый из праймеров сопоставим (комплементарен) с одной из цепей двуцепочечной матрицы, обрамляя начало и конец амплифицируемого участка.
После соединения (гибридизации) матрицы с праймером (отжиг), последний служит затравкой для ДНК-полимеразы при синтезе комплементарной цепи матрицы.


Проведение ПЦР

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

ПЦР проводят в амплификаторе — приборе, обеспечивающем периодическое охлаждение и нагревание пробирок, обычно с точностью не менее 0,1°C. Чтобы избежать испарения реакционной смеси, в пробирку добавляют высококипящее масло, например, вазелиновое. Добавление специфичеких ферментов может увеличить выход ПЦР-реакции.
Ход реакции

Обычно при проведении ПЦР выполняется 20 — 35 циклов, каждый из которых состоит из трех стадий. Двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94 — 96°C (или до 98°C, если используется особенно термостабильная полимераза) на 0,5 — 2 минуты, чтобы цепи ДНК разошлись. Эта стадия называется денатурацией — разрушаются водородные связи между двумя цепями. Иногда перед первым циклом проводят предварительный прогрев реакционной смеси в течение 2 — 5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров.
Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от праймеров и обычно выбирается на 4 — 5°С ниже их температуры плавления. Время стадии — 0,5 — 2 минут.


ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Часто используемые полимеразы наиболее активны при 72°C. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 — 15 мин.
Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию

Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку. Известно, что в лабораторной диагностике большинство ошибок (до 70%) совершается именно на этапе пробоподготовки. Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО  в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой — позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации (загрязнения) материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР.

Словарь

Литература

Источник: www.invitro.ru


?Простата – железа, расположенная под мочевым пузырем. Через неё проходит часть мочеиспускательного канала, предназначенного для выведения мочи и спермы.

Основная функция – выработка секрета, являющегося основой спермы иExpand text… необходимого для поддержания жизнедеятельности, двигательной активности и сохранения оплодотворяющей способности сперматозоидов. При болезнях простаты качество спермы меняется и подвижность сперматозоидов снижается, что может привести к бесплодию.

Предстательная железа отвечает за перекрытие уретры для предотвращения оттока мочи из мочевого пузыря во время полового акта.

С возрастом простата может увеличиваться (аденома простаты) и сжимать уретру, вызывая такие симптомы:

• затрудненное начало и учащенное мочеиспускание;
• слабость, прерывистость струи и подтекание мочи;
• ощущение неполного опорожнения мочевого пузыря.

Простатит – воспаление железы – чаще поражает мужчин моложе 40 лет и может развиться из-за инфекций мочевыводящих путей и инфекций, передаваемых половым путем. Симптомы могут включать боль при мочеиспускании, эякуляции, а также в области таза. Мужчины, перенесшие простатит, могут быть более подвержены риску развития рака простаты.

? Рак предстательной железы (РПЖ) – одно из наиболее распространенных злокачественных заболеваний у мужчин.

я скрининга на РПЖ у мужчин 45 лет и старше используют определение общего простатспецифического антигена (ПСА) в сыворотке крови.

ПСА – белок, вырабатываемый тканями простаты, часто повышен у мужчин с РПЖ. Но уровень ПСА может возрастать при аденоме простаты, хроническом простатите, на фоне инфекций, высоких физических нагрузок.

Для повышения специфичности лабораторного скрининга при ПСА 2-10 нг/мл («серая зона») определяют индекс здоровья простаты (phi), позволяющий дать предварительную оценку состояния железы. Phi можно применять при индивидуальной оценке вероятности РПЖ в комплексе с данными семейного анамнеза, клинической картиной, возрастом пациента, для решения вопроса о проведении биопсии, при выборе лечения.

Исследование выполняют только по назначению врача-уролога. Результат теста интерпретирует лечащий врач с учетом анамнеза.

Источник: vk.com

Что такое ПЦР-тесты и зачем их сдавать

Но генетические анализы нужны не так уж часто, поэтому в статье мы будем говорить про ПЦР-анализы на инфекции.

Как работает ПЦР-анализ. У большинства живых существ на нашей планете, за исключением некоторых вирусов с РНК-геномами, генетический материал представляет собой длинную двухцепочечную молекулу ДНК.


Для каждого микроорганизма набор реактивов нужен свой. Поэтому врачи назначают не ПЦР-анализ вообще, а исследование на конкретный микроорганизм. Так что ПЦР-тест на гепатит С не поможет найти в образце еще и хламидии.

ПЦР-анализы бывают качественные и количественные. Качественные позволяют понять, есть ли в образце генетический материал бактерии или вируса, который мы ищем. А количественные — сколько именно там этого материала. Если сделать несколько таких тестов во время лечения, станет ясно, действует ли на микробов назначенное лекарство.

Как подготовиться к ПЦР-анализу

Чтобы выяснить, какая инфекция поразила человека, у него обычно берут кровь, мочу, образцы клеток слизистой из ротоглотки или с шейки матки.

В России кровь по умолчанию рекомендуется сдавать натощак, не менее чем с интервалом в 8—12 часов после приема пищи. Однако за рубежом таких строгих правил нет: считается, что перед походом в лабораторию можно позавтракать без сладкого и жирного, например кашей без сахара и масла, куриной грудкой или яйцом. Так что если у вас был легкий завтрак, кровь сдавать можно. Пить тоже не запрещено, но лучше ограничиться чистой водой без газа.

Если врач назначил мазок из горла на ПЦР-анализ, за три часа до процедуры нельзя есть, чистить зубы, полоскать рот и рассасывать любые таблетки. Непосредственно перед взятием мазка не стоит жевать жевательную резинку. Если нос заложен, перед процедурой нужно как следует высморкаться.


Правила, по которым нужно сдавать мазок на ПЦР из половых органов, отличаются для мужчин и для женщин. Всем за 1—2 дня до исследования нужно отказаться от секса, а в течение 1,5—2 часов перед исследованием — воздерживаться от мочеиспускания. Женщинам за сутки до процедуры не следует проводить спринцевание, пользоваться свечами и антисептиками для подмывания. Во время менструации сдавать биологический материал нельзя.

Можно ли верить ПЦР-тесту

Ни один лабораторный тест не обеспечивает абсолютной точности, всегда есть вероятность ошибки. Причем ошибиться тест может в обе стороны: либо не найти искомую инфекцию у пациента, которой он на самом деле заражен, либо обнаружить ее у человека, болеющего чем-то другим или вовсе здорового.

Но здесь многое зависит от времени взятия образца. Если мазок из горла взяли через 3—4 дня после появления симптомов, то вирус уже мог успеть спуститься из ротоглотки в легкие, и тогда вероятность найти его в мазке составляет всего 40%.

О чем говорят результаты ПЦР-анализа

Проще всего разобраться с результатами качественных анализов: они могут быть либо положительными, либо отрицательными. Если результат положительный — значит, скорее всего, возбудитель в организме есть. Если отрицательный — скорее всего, его нет.

С результатами количественного ПЦР-анализа разобраться сложнее. Чтобы сказать, помогает ли лечение, нужно сделать несколько анализов — с интервалом от 2—3 дней до нескольких месяцев. Сравнивая старый и свежий результат, врач видит, что происходит с бактериями или вирусами в организме: становится ли их больше или, наоборот, меньше.

Если сделать всего один анализ, польза от количественного теста будет невелика: при положительном результате мы узнаем лишь то, что инфекция в организме действительно есть.

На этом бланке представлены результаты качественного и количественного теста на гепатит С — оба говорят, что вирус в организме есть. Через некоторое время после начала лечения нужно будет сделать повторный количественный анализ на гепатит С. Если концентрация вируса в биоматериале уменьшится, значит, лечение помогает. Фото: nuzdkp.ru
На этом бланке представлены результаты качественного и количественного теста на гепатит С — оба говорят, что вирус в организме есть. Через некоторое время после начала лечения нужно будет сделать повторный количественный анализ на гепатит С. Если концентрация вируса в биоматериале уменьшится, значит, лечение помогает. Фото: nuzdkp.ru

Чем заменить ПЦР-анализ — и можно ли так делать

Это зависит и от конкретного микроорганизма, и от типа анализа, который вам нужно сдать. Например, возбудителя урогенитального микоплазмоза — бактерию Mycoplasma genitalium — можно обнаружить только методом ПЦР. А возбудителя хламидиоза — Chlamydia trachomatis — удастся найти еще и методами иммуноферментного анализа (ИФА), прямой иммунофлюоресценции (ПИФ) и культуральным посевом (КП). Иногда анализ, проведенный другим методом, обходится дешевле, но может либо занять больше времени, либо оказаться менее точным.

Что касается количественных анализов, то в большинстве случаев имеет смысл сдать именно тот тест, который рекомендует врач. От точности количественного анализа зачастую зависит результат лечения.

Какие ПЦР-анализы можно сдать бесплатно

Если нужный вам анализ есть в стандарте лечения заболевания, а само заболевание входит в базовую — действующую по всей стране — или в территориальную программу ОМС, то этот анализ вам должны сделать бесплатно. Но на практике возможны нюансы.

Сколько стоит ПЦР-анализ

Цена ПЦР-анализа зависит от нескольких параметров.

Методики ПЦР, которую применяют в конкретной лаборатории. Например, в LabQuest для качественного определения вируса гепатита С применяют ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR) — это стоит 2780 Р. А в List Lab используют классический ПЦР-тест за 520 Р.

ПЦР в реальном времени предназначена для количественных тестов, но ее можно применять и для качественных анализов — правда, получится дороже, а разницы с более дешевым классическим вариантом ПЦР не будет.

Количества анализов, которые вы собираетесь сдавать. Например, в лаборатории «Инвитро» выявление возбудителей ИППП 7 типов методом ПЦР в мазке обойдется в 3100 Р, а определение одних только хламидий — в 835 Р.

Вида микроорганизма, который нужно обнаружить. Например, в лаборатории LabQuest анализ на коронавирусную инфекцию обойдется в 2500 Р, а анализ на возбудителя гонореи — в 360 Р.

Чтобы сравнить цены в разных клиниках, мы выбрали один анализ — на гепатит С, для которого берут кровь из вены. Цены указаны с учетом взятия крови.

Где сдать платный ПЦР-анализ на гепатит С

Анализ Цена с учетом забора крови Сроки
LabQuest Количественный 3625 Р 5 календарных дней
Качественный 2975 Р 8 календарных дней
List Lab Количественный 3430 Р 5 рабочих дней
Качественный 700 Р 4 рабочих дня
«Ситилаб» Количественный 3300 Р 5 рабочих дней
Качественный 920 Р 5 рабочих дней
«Инвитро» Количественный 3220 Р 1 рабочий день
Качественный 985 Р 1 рабочий день

Запомнить

  1. ПЦР-тесты помогают обнаружить фрагменты генетического материала бактерий, вирусов или других людей. Но для каждого микроорганизма реактив нужен свой, так что универсальных тестов ПЦР на все инфекции сразу не бывает.
  2. Подготовка к анализу зависит от того, какой биологический материал вы сдаете. Если кровь, то особо готовиться не надо. Для других материалов есть несложные правила — если их соблюдать, анализ будет точнее.
  3. Если вам назначили качественный ПЦР-анализ, имеет смысл сдавать его или в государственной лаборатории (если обследование положено по ОМС), или в частной, где окажутся подходящие цены.
  4. Если вам назначили количественный ПЦР-анализ, врач напишет в направлении не только название исследования, но и предпочтительный метод, которым нужно провести ПЦР-анализ. Если указания на метод нет — выбирайте ту лабораторию, цены в которой вас устраивают.

Источник: journal.tinkoff.ru

Исследования методом ПЦР    (ИНВИТРО)

 

Наименование

Номенклатура

Цена (руб.)

1

Гонорея                                                                                 А 26.20.022.001

520

2

Трихомонада                                                                        А 26.20.026.001

520

3

Хламидия                                                                              А 26.05.012.001

520

4

Микоплазма Hominis                                                            А 26.20.028.001

520

5

Микоплазма генит.                                                               А 26.20.027.001

520

6

Уреаплазма                                                                           А 26.20.029.001

520

7

Гарднерелла                                                                          А 26.20.030.001

520

8

Герпес 1, 2 тип (качественный/количественный)

                                                                     А26.05.032.001/А 26.05.032.002

520

9

Цитомегаловирус                                                                 А 26.05.017.001

520

10

Мононуклеоз                                                                        А 26.05.011.001

520

11

Грибы кандида  из влагалища                                             А 26.20.015

520

12

ВПЧ (папилломавирус)  16  и 18 типов, КВМ                   А 26.20.009.005

460

13

ВПЧ (папилломавирус)  6-11 типов, КВМ                         А 26.20.009.008

470

14

Определение ВПЧ высокого онкогенного риска,

скрининг 14 типов, КВМ                                                     А 26.20.009.002

660

15

ПЦР ВПЧ  14 типов,

(генотипирование ДНК, КВМ)                                           А 26.20.009.004

810

16

Определение ВПЧ, скрининг 4 типов (6, 11, 16, 18) +КВМ

640

17

Определение ВПЧ высокого онкогенного риска, скрининг 15 типов +КВМ                                                                                    А 26.20.009.002

740

18

Дифференцированное определение  ВПЧ  21 типа +КВМ   А 26.20.009.004

2110

19

Туберкулез                                                                           А 26.05.047.001

590

20

Токсоплазмоз                                                                       А 26.05.013.001

420

21

Простой герпес                                                                          А 26.05.025

400

22

Герпес 6 тип                                                                        А 26.05.033.001

400

23

ДНК вируса гепатита В  (качественный)                          А 26.05.020.001

420

24

ДНК вируса гепатита В  (количественный)                     А 26.05.020.002

1660

25

РНК вируса гепатита А                                                        А 26.05.030.001

470

26

РНК вируса гепатита С (количественное определение)        А 26.05.09.002

1660

27

РНК вируса гепатита С (качественное определение)           А 26.05.019.001

560

28

Вирус гепатита С, количественное определение РНК вируса и генотипирование (типы 1, 2, 3) (Hepatitis C Virus (HCV) RNA, Quantitative PCR, Genotyping (Types 1, 2, 3))

960

29

РНК вируса гепатита G                                                        А 26.05.026.001

470

30

РНК вируса гепатита D (качественный)                            А 26.05.023.001

470

31

РНК вируса гепатита Е                                                          А 26.05.031.01

470

32

РНК вируса краснухи (качественный)                               А 26.05.039.001

470

33

Бореллиоз                                                                              А 26.05.054.001

470

34

Листерия  (качественный)                                                   А 26.05.037.001

420

35

Комплекс мутаций системы гемостаза (КМГ)

1040

36

Коклюш (соскоб со слизистой)                                           А 26.08.031.001

420

Источник: xn--80afeytbigq7i.xn--p1ai


Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!:

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте, как обрабатываются ваши данные комментариев.